Третья полнометражная картина франшизы «Ночь в музее» снималась под руководством режиссера Брайана Левана, а главную роль ночного сторожа Ларри Дэйли вновь исполнил Бен Стиллер. Действие разворачивается в Музее естественной истории в Нью-Йорке, где Ларри уже давно привык к необычным ночным приключениям: по залам ходят ожившие экспонаты, от доисторических животных до исторических деятелей.
Действие фильма разворачивается в мире после глобальной катастрофы, когда атмосфера Земли настолько отравлена, что жизнь на поверхности стала невозможной. Два главных героя получают ответственное задание: охранять подземную базу, где в криогенном сне хранятся последние представители человечества — ученые, способные разработать способ восстановить пригодную для жизни среду.